【摘要】 目的 探讨酵母多糖对机体免疫功能的影响，从而为维护人体健康提供理论依据。
方法 每批20只小鼠随机分为酵母多糖组和正常对照组，每组10只。 酵母多糖组每天灌0.2ml浓度为80mg/ml的酵母多糖溶液，正常对照组每天灌服0.2ml0.9％氯化钠溶液，11d后处死，测定小鼠各项免疫指标。 （1）固有免疫：半体内法检测小鼠巨噬细胞吞噬功能；（2）细胞免疫：小鼠后足迟发型超敏反应强度；（3）体液免疫：血凝法测定小鼠血清中溶血素含量；（4）免疫系统：对脾脏和胸腺称重计算脾脏指数和胸腺指数。
结果 酵母多糖组小鼠巨噬细胞吞噬率和吞噬指数分别为（29.3±1.95）％、0.43±0.03，明显高于正常小鼠组的（25.7±2.05)%、0.39±0.18（ P ＜0.01）；酵母多糖组小鼠左右后足重量差为（22.1±2.4）ｇ，与正常组小鼠的（17.9±3.3）ｇ 比较差异有统计学意义（ P ＜0.01）；酵母多糖组小鼠抗体积数为 33±4，高于正常组小鼠的 32±7（ P ＜ 0.05）；酵母多糖组小鼠脾脏指数和胸腺指数分别为 5.50 ± 0.20、2.21±0.35，分别较正常组小鼠的5.01±0.28、1.87±0.33有明显提高（ P ＜ 0.01）。 结论 酵母多糖可以显著提高机体的免疫功能，长期食用发酵食品有助于身体健康。
【关键词】 酵母多糖；食品卫生；免疫功能
酵母多糖为酵母菌细胞壁的多糖成分，为葡萄糖甘露糖蛋白质复合物。 酵母多糖是一种在消化道内不能被动物消化吸收，但能被动物体内有益菌利用的功能性寡糖，作为一种绿色非营养调控物质，影响糖代谢，促进肠道功能。本研究以正常小鼠为实验对象，测定小鼠的非特异性免疫功能、特异性免疫功能及脏器指数等免疫学指标，探讨酵母多糖对机体免疫功能的影响，进一步确定酵母多糖的生物学价值，为酵母多糖的生物学应用及相关产品开发提供理论依据，为维护人体健康提供保障。
1.材料与方法
1.1 材料
1.1.1 主要试剂 酵母多糖由河北联合大学药学院提供。
1.1.2 实验动物 昆明小鼠20只：SPF级，雌雄各半，体重(20±2)ｇ，6～8周龄，购自中国医学科学院实验动物研究所（合格证编号：0123883）。
1.2 方法
1.2.1 实验动物分组：将每批次小鼠随机分为酵母多糖组和正常对照组，每组10只。 全部实验小鼠饲喂基础日粮，适应性喂养 10ｄ 后，酵母多糖组小鼠每天上午灌服 0.2ml浓度为80mg/ml的酵母多糖溶液 1 次，正常对照组小鼠每天上午灌服0.2ml0.9％氯化钠溶液 １ 次，连续 11 ｄ，次日处死。 根据各项实验检测项目的具体步骤要求，进行免疫学检测。
1.2.2 巨噬细胞吞噬功能的测定：采用半体内法测定巨噬细胞吞噬功能，反映小鼠非特异性免疫功能状态。 实验前 1ｄ每只小鼠腹腔注射4％的淀粉溶液 1 ｍｌ，诱导巨噬细胞向腹腔趋化。24h后，每只小鼠腹腔注射新鲜的 10％鸡红细胞悬液1ml、30min后，颈椎脱臼处死小鼠，迅速固定于小鼠操作板上。 经腹腔注入2ml 0.9％氯化钠溶液，轻揉腹部1mi。 然后无菌打开小鼠腹腔，吸出1ml 腹腔灌洗液，滴于洁净载玻片上，移至 37℃温箱孵育30min。 经 0.9％氯化钠溶液漂洗，去除未贴片细胞，晾干。 甲醇溶液固定后，用 Giemsa- 磷酸盐缓冲液染色20min，随后蒸馏水漂洗，晾干，在光学显微镜下观察巨噬细胞对鸡红细胞的吞噬和清除情况，计算吞噬百分率和吞噬指数，计算公式如下：
吞噬百分率 ＝ 吞噬鸡红细胞的巨噬细胞数／ 计数的巨噬细胞数 x100％。
吞噬指数 ＝ 被吞噬的鸡红细胞总数／ 计数的巨噬细胞数
1.2.3 迟发型超敏反应测定：将所实验小鼠适应性喂养 11ｄ后，在 2组小鼠腹腔内注射新鲜的 10％（V/V） 鸡红细胞（CRBC）悬液，对小鼠进行免疫。 在处死前24h，每只小鼠左后足掌注射 50μｌ 新鲜的 10％（V/V）CRBC悬液，右后足掌注射等量的 0.9％氯化钠溶液。 24ｈ后，颈椎脱臼处死小鼠，沿相同部位切下小鼠的双后足，并随即在电子天平上精确称重，计算左右后足重量差。 小鼠左右后足重量差越大，表示迟发型超敏反应引起的炎性反应强度越大，小鼠机体内细胞免疫功能越强。
1.2.4血清溶血素含量测定：采用血凝法检测 2组小鼠血清中溶血素含量，用 0.9％氯化钠溶液将新鲜的小鼠血清倍比稀释，随后将不同稀释倍数的血清分别加入微量血凝板内，每孔加100μｌ。 再加入100μｌ 新鲜制备的0.5％（V/V）鸡红细胞悬液，充分混匀，置入湿盒内加盖，放置于37℃温箱孵育3ｈ，随即观察血凝板中鸡红细胞的凝集程度。 一般将血球凝集程度分为5级（0～IV），评级标准如下：0级：红细胞全部下沉，在孔底部集中形成致密圆点状，周围液体清晰；Ⅰ级：红细胞大部分沉集在孔底成圆点状，周围有少量凝集的红细胞；Ⅱ级：凝集的红细胞在孔底形成薄层，中心可以有一个明显的疏松的红点；Ⅲ级：凝集的红细胞均匀的铺散在孔底形成一薄层，中心隐约可见一个小红点；Ⅳ级：凝集的红细胞均匀的铺散在孔底形成一薄层，凝块有时可成卷折状。
依据下列公式，计算抗体积数：
抗体积数 ＝ （S1 ＋ 2S2 ＋ 3S3 ＋ ． ． ． ． ． ． ｎSｎ）
公式中 1、2、3． ． ． ． ． ． ｎ 代表对倍稀释的指数，Ｓ 代表凝集程度的级别，抗体积数越大，表示小鼠体内抗体水平越高。
1.2.5 小鼠脏器指数测定：将小鼠断颈处死，称其体重，取出脾脏和胸腺，用滤纸吸干水分后电子天平分别称重，计算胸腺指数、脾脏指数。
胸腺指数 ＝ 胸腺重量（ｍｇ） ／ 小鼠体重（ｇ）
脾脏指数 ＝ 脾脏重量（ｍｇ） ／ 小鼠体重（ｇ）
1.3 统计学分析 应用 SPSS 13.0统计软件，计量资料以 x ± s表示，采用方差分析及 q 检验，计数采用 X2检验， P ＜0.05为差异有统计学意义。
2. 结果
2.1 巨噬细胞吞噬功能的比较
酵母多糖组小鼠巨噬细胞吞噬率及吞噬指数均显著高于正常小鼠组（ P 均 ＜ 0.01）。 见表1。
2.2 后足迟发型超敏反应强度比较
与正常对照组比较，酵母多糖组左右后足重量差显著提高（ P ＜ 0.01）。 见表2。
2.3 血清溶血素含量比较
酵母多糖组抗体积数与正常对照组比较差异有统计学意义（ P ＜ 0.05）。 见表3。
2.4 脏器指数比较
酵母多糖组与正常对照组比较，其脾脏指数和胸腺指数均有显著提高（ P ＜ 0.01）。 见表4。
3. 讨论
饮食习惯对人体健康具有重要影响。 总的来讲，我国北方人喜欢吃面食，南方人喜欢吃大米，北方人比较粗壮，南方人单薄。 这除了遗传因素外，饮食习惯是否是其原因之一，我们的实验结果可望给出答案。 面食中的主要食品是馒头，它是经酵母发酵而成，我们只知其口感好，便于食用（松软），易于消化。经我们的实验研究发现，它还能提高机体免疫力。
巨噬细胞是机体免疫系统的主要细胞之一，在固有免疫和适应性免疫中均起重要作用，具有吞噬、杀伤、提呈抗原、分泌生物活性物质、调控机体免疫以及抑制肿瘤等多种功能。
迟发型变态反应的强度，能较好的体现机体的细胞免疫功能状态，迟发型变态反应的增加表明细胞免疫功能的增强。 抗体是机体杀灭病原菌和清除外来抗原的重要免疫活性物质，体内抗体的含量是机体体液免疫功能状态的标志，体内抗体含量的增加说明体液免疫功能的增强。 脾脏和胸腺为小鼠重要的免疫器官，主要由免疫细胞构成，其重量是免疫功能的物质基础。 当免疫器官的重量增加，其相对于体重的比值即增加，用脏器指数表示。 脏器指数的变化，能够反映机体免疫功能的状态。 本研究结果显示：与正常对照组比较，酵母多糖组小鼠巨噬细胞吞噬功能增强；左右后足重量差增大，即迟发型变态反应引起的炎性反应强度变大；血清中溶血素含量增加；脾脏指数和胸腺指数都有所提高；说明酵母多糖通过对机体非特异性免疫、特异性免疫及免疫器官等作用，从而增强机体免疫功能。 因此，酵母多糖可以提高机体免疫功能，长期食用发酵食品有助于身体健康。
